There is provided a method and serum-free cell culture medium novel for culturing MDCK cells. In particular, non-tumorigenic MDCK cells. Eliminating the need for cell culture medium exchange step, (for example, in particular, attenuated influenza virus and temperature-sensitive and cold-adapted or / and / or) method of producing is provided influenza virus. Methods and new media This is useful to grow to high titers in cell culture influenza virus. Total recovery of live virus is even higher the present invention, the non-specific endonuclease (eg, Benzonase) influenza virus that causes the host cell DNA below the specification required by the regulatory agency (HCD), and host cell proteins (HCP) To provide a purification method for purifying. [Selection] Figure Figure 1MDCK細胞を培養するための新規な無血清細胞培養培地および方法が提供される。特に、非腫瘍形成性MDCK細胞。細胞培養培地交換工程の必要を無くす、インフルエンザウイルス(例えば、特に、低温適応および/または温度感受性および/または弱毒インフルエンザウイルス)の生産方法が提供される。この新規な培地および方法はインフルエンザウイルスを細胞培養物で高力価まで増殖させるのに有用である。本発明はさらに生ウイルスの総回収率が高く、規制機関により要求される明細を下回る宿主細胞DNA(HCD)、宿主細胞タンパク質(HCP)および非特異的エンドヌクレアーゼ(例えば、ベンゾナーゼ)をもたらすインフルエンザウイルスを精製するための精製方法を提供する。【選択図】 図1