本发明属于烟草基因工程领域,具体涉及一个烟草miRNA基因Nt‑miRNA203在烟草烟碱含量调节中的应用的专利申请。Nt‑miRNA203成熟体长度为24bp,该miRNA基因的基因组序列长度为401bp,序列如SEQ ID NO.3所示。Nt‑miRNA203与烟草中烟碱转运蛋白MATE1调节相关,进而调节烟碱含量分布情况。进一步地对该基因的功能验证表明,超表达该基因后,可抑制烟碱转运通路有关的靶基因,从而调节烟碱分布情况,最终呈现烟叶中烟碱含量降低的技术效果。基于此技术效果,可为烟草中烟叶烟碱含量调节、以及低烟碱品种的培育奠定一定技术基础。