We developed a time-resolved fluorescence resonance energy transfer high-throughput screening assay (HTS-TR-FRET), to identify inhibitors of capsid dimerization, using the C-terminal domain (CTD) of HIV-1 capsid. This assay was used to screen the Library of Pharmacologically Active Compounds, composed of 1,280 in vivo active drugs, and identified Ebselen, an organoselenium compound, as a potent inhibitor of HIV-1 capsid CTD dimerization. Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopic analysis confirmed the direct interaction of Ebselen with the HIV-1 capsid CTD and dimer dissociation when Ebselen is in two-fold molar excess. Electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS) reveals Ebselen covalently binds the HIV-1 capsid CTD, likely via a selenylsulfide linkage with Cys 198 and Cys 218. This compound presents anti-HIV activity in single- and multiple-round of infection in permissive cell lines as well as in primary peripheral blood mononuclear cells.La présente invention concerne un essai de criblage à haut débit par transfert d'énergie de fluorescence par résonance à résolution temporelle (HTS-TR-FRET), permettant d'identifier des inhibiteurs de la dimérisation de capsides, à l'aide du domaine C-terminal (CTD) d'un capside du VIH -1. Ce dosage a été utilisé pour cribler la bibliothèque de composés pharmacologiquement actifs, composée de 1 280 médicaments actifs in vivo, et a identifié l'Ebselen, un composé d'organosélénium, comme inhibiteur puissant de la dimérisation du CTD d'un capside du VIH-1. Une analyse spectroscopique par résonance magnétique nucléaire (RMN) a confirmé l'interaction directe de l'Ebselen avec le CTD du capside du VIH-1 et la dissociation du dimère lorsque l'Ebselen se trouve en une proportion en excès molaire d'un facteur deux. La spectrométrie de masse à ionisation par électronébulisation (ESI-MS) révèle que l'Ebselen se lie de manière covalente au CTD du capside du VIH-1, probablement par l'intermédiaire d'une liaison de sélénylsulfure a
