本发明公开了抑制NPC1基因表达的siRNA的应用,属于生物医药技术领域,用于抑制NPC1基因表达的siRNA至少为以下两条siRNA中一种:NPC1‑siRNA‑1,其正义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其反应链的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;NPC1‑siRNA‑3,其正义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,其反应链的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明设计的NPC1‑siRNA‑1、NPC1‑siRNA‑3在HCT‑116和HCT‑8细胞中均能良好地抑制NPC1基因的表达;在NPC1‑siRNA‑1、NPC1‑siRNA‑3转染下,敲低NPC1的肿瘤细胞对5‑FU的耐药作用得到降低;本发明设计的NPC1‑siRNA和5‑氟脲嘧啶可以联合用于治疗结直肠癌。