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从鱼类肠系膜脂肪组织中克隆鱼类ob基因的方法
- 专利权人:
- 安徽省农业科学院水产研究所
- 发明人:
- 潘庭双,龙良启,王永杰,戴汉川,侯冠军
- 申请号:
- CN200810023716.8
- 公开号:
- CN101280302A
- 申请日:
- 2008.04.18
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2008
- 代理人:
- 金惠贞
- 摘要:
- 本发明涉及从鱼类肠系膜脂肪组织中克隆鱼类ob基因的方法。解决了采用现有克隆技术较难克隆出鱼类ob基因的问题。本发明方法全新设计一对引物P1、P2,结构如下:P1:GAGGAATTCGTGCCTATCCAGGAT GAATTC为EcoRI酶切位点,P2:GACAAGCTTCTCAGCATTAGGGCG AAGCTT为HindIII酶切位点,从鱼类的肠系膜脂肪组织RNA中扩增出了不同鱼的ob基因片断,并将ob基因分别克隆至pMD18-T载体中,经酶切鉴定和聚合酶链反应(PCR)鉴定后,进行序列测定,达到能够高效克隆出鱼类ob基因的目的。本发明每个引物含有一个特异性酶切位点,特异性酶切位点的存在为酶切签定和定向克隆提供有利条件。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/