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检测豇豆胰蛋白酶抑制剂的免疫金颗粒试剂条的制备方法
- 专利权人:
- 中国环境科学研究院
- 发明人:
- 肖能文,孔瑾,高轶楠,李俊生
- 申请号：
- CN201110189154.6
- 公开号：
- CN102279272A
- 申请日:
- 2011.07.06
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2011
- 代理人:
- 秦月贞
- 摘要：
- 本发明涉及一种检测豇豆胰蛋白酶抑制剂（CpTI）的免疫金颗粒试剂条的制备方法，包括：重新优化CpTI基因密码子，构建CpTI基因表达序列，构建CpTI基因和谷胱甘肽-S-转移酶（GST）基因融合表达载体，利用亲合层析柱纯化和切割获得CpTI蛋白，再将佐剂溶合CpTI蛋白后免疫兔和小鼠，分别获得抗CpTI多克隆抗体和单克隆抗体，采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金，由抗CpTI蛋白单克隆抗体和多克隆抗体通过夹心法获得检测CpTI蛋白的免疫金颗粒试剂条。本发明的有益效果为：通过夹心法制备胶体金试剂条，使得检测的特异性大大增加；能定性检测植株中是否含有CpTI蛋白，检测最低限为10ng/ml；本试剂条操作简单，不污染环境。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
