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一种新型冠状病毒肺炎dsRNA疫苗的制备方法
- 专利权人:
- 翁炳焕
- 发明人:
- 翁炳焕,李兰娟
- 申请号:
- CN202010080886.0
- 公开号:
- CN111321142A
- 申请日:
- 2020.05.02
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明公开了一种用于医学领域的新型冠状病毒肺炎dsRNA疫苗的制备方法,扩增nCoV2019的靶向干扰基因shRNA序列,所得产物与空干扰载体pSilencer经BamH I和Hind III酶切而构建干扰载体pSilencer‑shRNA,该干扰载体经感受态大肠杆菌DH5a扩增和shRNA插入正确性鉴定后,用Hind lII和EcoR I同时酶切pSilencer‑shRNA和空穿梭载体pDC312,构建穿梭载体pDC312‑shRNA,使其与腺病毒骨架质粒pBHGloxAEl共转染HEK293细胞,在胞内同源重组而获得重组腺病毒Ad‑shRNA,再经HEK293细胞多次扩增和纯化制备nCoV dsRNA疫苗,通过喷雾接种,重组腺病毒载体Ad将shRNA导入呼吸道上皮细胞并在细胞内合成dsRNA,继之特异性诱导同源的nCoV mRNA降解,产生抗nCoV2019的转录后基因沉默或RNA干扰。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/