The invention extrusion process without diethyl ether (diethyl ether), and ethanol production of (ethanol) a nucleic acid-containing nano-liposomes, containing the steps to mix the lipid solution and the nucleic acids are dissolved in an aqueous solution the lipids are dissolved in a mixed solvent of a method, the method containing the nucleic acid of 100 to 150 nm in diameter produced by the present invention relates to nano-liposome, nucleic acids and liposome-containing nanoparticles for producing the kit.본 발명은 압출과정 없이 디에틸에테르(diethyl ether) 및 에탄올(ethanol)의 혼합 용매에 지질이 용해된 지질 용액과, 핵산이 용해된 수용액을 섞는 단계를 포함하는, 핵산 함유 나노 리포솜의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 직경 100 내지 150 nm의 핵산 함유 나노 리포솜, 및 핵산 함유 나노 리포솜 제조용 키트에 관한 것이다.