Lyashenko Alla Anatolevna;Lyashenko Alla Anatolevna
发明人:
Lyashenko Alla Anatolevna (RU),Ляшенко Алла Анатольевна (RU),Uvarov Valentin Yurevich (RU),Уваров Валентин Юрьевич (RU)
申请号:
RU2016142688
公开号:
RU0002640017C1
申请日:
2016.10.31
申请国别(地区):
RU
年份:
2017
代理人:
摘要:
FIELD: medicine.SUBSTANCE: invention can be used to isolate tumour antigens for tumour immunotherapy. For this, 1 gram of tumour is chopped on a cooled surface, 9 ml of buffer (pH 7.0) consisting of 10 mM of NaHCO3, 10 mM of EDTA, 2 mM of PMSF is added, and homogenized. Then it is centrifuged first at 20,000 g at 4°C for 30 minutes, and then at 100,000 g at 4°C for 90 minutes. The supernatant is subjected to ultra-/diafiltration using a membrane with a cut-off limit of 50 kDa, using a formulation buffer (pH 7.0) consisting of 10 mM of NaHCO3 and 150 mM of sodium chloride.EFFECT: obtaining of a fraction consisting of complexes represented by different classes of heat shock proteins, which determines a wide range of associated tumour peptides.1 ex, 2 tbl, 2 dwgИзобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для выделения опухолевых антигенов для иммунотерапии опухолей. Для этого измельчают 1 грамм опухоли на охлаждаемой поверхности, добавляют 9 мл буфера (рН 7,0), состоящего из 10 мМ NaHCO3, 10 мМ ЭДТА, 2 мМ PMSF, и гомогенизируют. Затем центрифугируют сначала при 20000 g при 4°С в течение 30 минут, а затем при 100000 g при 4°С в течение 90 минут. Надосадочную жидкость подвергают ультра-/диафильтрации, используя мембрану с пределом отсечения 50 кДа, при этом используют формулирующий буфер (рН 7,0), состоящий из 10 мМ NaHCO3 и 150 мМ хлорида натрия. Использование данного способа позволяет получить фракцию, состоящую из комплексов, представленных различными классами белков теплового шока, что определяет широкий спектр связанных с ними опухолевых пептидов. 1 пр., 2 табл., 2 ил.