The present invention relates to a single molecule type based on the principle of fluorescence resonance energy transfer that enables non-invasive measurement of serine threonine kinase activity, tyrosine kinase activity, activity of low molecular weight GTP binding protein, and the like. It is an object of the present invention to provide a single molecule FRET biosensor including a FRET biosensor linker and a general linker. A polypeptide comprising 52 amino acid residues or more and 400 amino acid residues or less, wherein at least 95% of the total number of amino acid residues consists of glycine, serine, threonine and alanine, glycine is 35 to 65%, serine And a single molecule type FRET biosensor comprising a linker containing 10 to 40% of at least one of threonine, 10 to 40% of alanine, and a general linker, and an expression vector containing a gene encoding the biosensor. Cells and transgenic non-human animals.【課題】本発明は、非侵襲的なセリンスレオニンリン酸化酵素活性、チロシンリン酸化酵素活性、低分子量ＧＴＰ結合タンパク質の活性などの測定を可能にする、蛍光共鳴エネルギー移動の原理に基づく一分子型ＦＲＥＴバイオセンサーのリンカー及び概リンカーを含む一分子型ＦＲＥＴバイオセンサーなどを提供することを課題とする。【解決手段】５２アミノ酸残基以上４００アミノ酸残基以下を含むポリペプチドであって、全アミノ酸残基数の少なくとも９５％がグリシン、セリン、スレオニン及びアラニンからなり、グリシンを３５から６５％、セリン及びスレオニンの少なくともいずれかを１０から４０％、アラニンを１０から４０％含むリンカー、及び概リンカーを含む一分子型ＦＲＥＴバイオセンサー、該バイオセンサーをコードする遺伝子を含む発現ベクターを保持する形質転換された細胞およびトランスジェニック非ヒト動物である。
