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昆虫细胞表达sST2做为测定血清中sST2浓度的校准品
- 专利权人:
- 吉林大学;长春恒晓生物科技有限责任公司
- 发明人:
- 王珺楠,李宝民,杜培革,刘斌,关大伟,赵雪,应瑛,隋宝真,王玉华,史永峰,王贺,关恒,安丽萍,苑广信,王曼力,林林,张继海
- 申请号：
- CN201711358221.6
- 公开号：
- CN108106894A
- 申请日:
- 2017.12.17
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 白冬冬
- 摘要：
- 本发明属于生物技术领域。公开了用昆虫细胞表达可溶性生长刺激表达蛋白2做为ELISA测定血清中sST2浓度的校准品过程，此方法步骤如下：提取T47D细胞 RNA,用于合成cDNA，用PCR扩增出sST2DNA；用sST2 DNA构成pFastBac‑Flag‑sST2载体，再转导入HD10Bac 细菌株，产生重组Flag‑sST2昆虫病毒质粒；把Flag‑sST2AcNPV质粒DNA转导进昆虫细胞，产生重组Flag‑sSt2AcNPV；用Flag‑sST2 AcNPV感染SF9细胞，表达出Flag‑sST2蛋白，用Anti‑Flag M2 affinity agarose纯化出具有自然结构和抗原性Flag‑sST2；用Flag‑sST2作为校准品，建立双夹心酶联免疫法，测定血清或其它液体中sST2 浓度,此发明制备出具有蛋白自然结构和抗原性Flag‑sST2，做为测定液体中sST2浓度的校准品，用于临床检测血清中sST2浓度。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
