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一种ADP-葡萄糖焦磷酸化酶突变体及其筛选方法与应用
- 专利权人:
- 广东省农业科学院作物研究所
- 发明人:
- 王章英,房伯平,陈新亮,陈景益,张雄坚,黄立飞,罗忠霞
- 申请号：
- CN201510494114.0
- 公开号：
- CN105087516A
- 申请日:
- 2015.08.12
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 张耐寒
- 摘要：
- 本发明提供一种ADP-葡萄糖焦磷酸化酶突变体及其筛选方法与应用，该筛选方法包括以下步骤：1)第一链cDNA的合成；2)PCR扩增；3)构建AGPase大小亚基cDNA原核表达载体；4)活性筛选。本发明将来源于不同物种的AGPase大亚基基因与小亚基基因进行远缘杂交，高可控性地获重组基因的表达载体；再转化大肠杆菌glgC突变菌株，再接种于Conberg加富固体培养基上，最后用碘-碘化钾染色筛选出高活性ADP-葡萄糖焦磷酸化酶突变体，该筛选方法简单易行、稳定可靠；该ADP-葡萄糖焦磷酸化酶突变体酶活性、糖原含量明显高于野生型玉米AGPase，且对底物亲和力没有明显改变，但对激活剂敏感性增加。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
