本发明公开了一种黑斑蛙蛋白酶抑制肽及其基因在制药和化妆品中的应用。所述黑斑蛙蛋白酶抑制肽是由17个氨基酸组成的环肽,分子量1965.89道尔顿,等电点10.11,其氨基酸序列为:SerLeuSerGlyCysTrpThrLysSerPheProArgLysProCysLeuArg(SLSGCWTKSFPRKPCLR)(SEQ ID NO.1),上述多肽的第五半胱氨酸和第十五位半胱氨酸形成分子内二硫键。所述黑斑蛙蛋白酶抑制肽的基因序列由SEQ ID NO.2组成,其中编码有功能的成熟黑斑蛙蛋白酶抑制肽是第130‑180位核苷酸。本发明公开了八种黑斑蛙蛋白酶抑制肽改造肽及其在制药中的应用。本发明黑斑蛙蛋白酶抑制肽及改造肽具有合成方便、活性强、致敏性低、稳定性好的特点,能够抑制多种丝氨酸蛋白酶,可以作为制备预防或治疗与胃炎或胰腺炎相关或血栓性心脑血管疾病的药物以及制备抗皱化妆品应用。