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一种重组大肠杆菌热敏性肠毒素突变体蛋白的表达及制备方法
- 专利权人:
- 上海市农业科学院;上海佳牧生物制品有限公司
- 发明人:
- 刘惠莉,哈卓,殷秀辰
- 申请号：
- CN201410331148.3
- 公开号：
- CN105238805A
- 申请日:
- 2014.07.11
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 费开逵`崔兆慧
- 摘要：
- 本发明公开了一种重组大肠杆菌热敏性肠毒素突变体蛋白的表达及制备方法，通过设计引物，以质粒pET30a-LTRG为模板，进行PCR扩增，得到A亚基C端和B亚基的N端均带有His标签的重组大肠杆菌热敏性肠毒素突变体LTRG基因，选择冷休克载体pcoldII，构建出pcoldII-LTRG表达载体，并对其在低温条件下进行可溶性表达，之后采用Ni柱亲和层析纯化的方法对大量表达的蛋白质进行纯化。本发明利用冷休克基因CSPA获得高效的表达能力，进行诱导表达后，可溶性表达的产物不需进行变性和复性，省掉了蛋白质变性及复性的繁琐过程，避免了变性及复性过程中蛋白质的损失。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
