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黄鳝芳香化酶保守区的原核表达载体pMAL-Arom19及其构建方法和应用方法
- 专利权人:
- 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
- 发明人:
- 丁炜东,曹丽萍,曹哲明,邴旭文
- 申请号:
- CN201210275140.0
- 公开号:
- CN102796754A
- 申请日:
- 2012.08.03
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 李纪昌
- 摘要:
- 本发明提供一种Arom19的原核表达载体pMAL-Arom19,该载体含有T7启动子和终止子、细菌核糖体结合位点RBS和Arom19基因保守区片段及一个麦芽糖结合蛋白标签。构建此载体的方法为采用RT-PCR方法从黄鳝脑中扩增出长约639bp的目的序列Arom19基因保守区,克隆至T载体中,经酶切鉴定和序列测定分析确认序列的正确性后,将此片段克隆到表达载体pMAL-c2x中构建重组表达质粒pMAL-Arom19。利用该载体转化大肠杆菌实现Arom19保守区蛋白的高水平表达,进一步纯化获得高纯度的重组Arom19蛋白质。实验证实,用本发明提供载体制备Arom19保守区蛋白具有较强的免疫原性,能刺激机体产生免疫应答。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/