Disclosed is a method for preparation of a chitosan oligosaccharide composition capable of increasing a content of disaccharide in chitosan oligosaccharide with excellent effects of reducing HbAlc and blood glucose as well as excellent thermal stability. The method for preparation of a chitosan oligosaccharide composition includes: adding chitosan to distilled water to swell the chitosan firstly treating the chitosan with a chitosanase to prevent the chitosan solution from becoming a state of being viscose, then, adding an organic acid to a mixed solution of the chitosan and chitosanase at a predetermined time interval bit by bit over several additions allowing mutual reaction between the chitosan, chitosanase and organic acid and inactivating the chitosanase to obtain the chitosan oligosaccharide composition. Further, a medicine and/or health supplement food which is effective in preventing and treating diabetes, including at least 40% of disaccharide without monosaccharide, is also disclosed.본 발명은 당화혈색소 감소 및 혈당 감소 효과가 우수한 키토산올리고당 2당 함량을 증가시키며 열안정성이 우수한 키토산올리고당 조성물을 제조하는 방법을 제공한다. 이러한 본 발명의 키토산올리고당 조성물의 제조방법은 키토산을 증류수에 첨가하여 키토산을 팽윤시키는 단계와, 키토산 용액이 점성상태가 되는 것을 방지하기 위해 키토산에 키토산아제 효소를 먼저 처리한 후, 키토산과 키토산아제 효소가 혼합된 용액에 유기산을 시간 간격을 두고 복수회에 걸쳐 나누어 첨가하는 단계와, 키토산과, 키토산아제 효소와, 유기산을 상호 반응시키는 단계와, 키토산아제 효소를 불활성화시키고 키토산올리고당 조성물을 수득하는 단계를 포함한다. 또한, 본 발명은 단당이 없고 2당 함량이 적어도 40중량%로서 2형 당뇨의 당화혈색소 및 혈당을 감소시키는 효과가 우수한 당뇨 예방 및 치료에 효과가 있는 치료용 의약품 내지는 건강기능식품을 제공한다.
