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一种制备重组内参GAPDH抗体的表达载体的构建方法
- 专利权人:
- 武汉金开瑞生物工程有限公司
- 发明人:
- 华权高,沈鹤霄,马峰,罗绍祥,肖颖,舒芹,徐春雷,王静,邓陈玲,易汪雪,李昆鹏
- 申请号：
- CN201611256120.3
- 公开号：
- CN106636202A
- 申请日:
- 2016.12.30
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 黄君军
- 摘要：
- 本发明公开了一种制备重组内参GAPDH抗体的表达载体的构建方法，包括以下步骤：以甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶(GAPDH)为免疫原对小鼠进行免疫后，提取脾脏总RNA，在两端序列设计特异性引物；将助表达序列的基因、组氨酸标签基因和β2微球蛋白基因分别连接到重链可变区和轻链可变区得到目的片段；在重链可变区的上游和轻链可变区下游分别引入双酶切位点，通过PCR技术将目的片段克隆到载体pFUSEss‑CHIg‑hG1上，即获得制备重组内参GAPDH抗体的表达载体。该方法构建的表达载体能够进行高效表达，以解决GAPDH表达量低的问题。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
