Distribution image of molar concentration ratios of the first and second biological substances contained in the biological tissue having the first, second, third and fourth isosbestic points in order from the short wavelength side in the absorption spectrum in the predetermined wavelength region In which the first and second isosbestic points are divided by the first wavelength region and the second and third isosbestic points. Light extracted from white light by the first optical filter that selectively extracts the light in the third wavelength range divided by the second wavelength range and the third and fourth isosbestic points. Using the light extracted from the white light by the step of acquiring the first imaging data G1 by imaging the biological tissue using the second optical filter for selectively extracting the light in the second wavelength range To acquire the second imaging data G2 and the first imaging data G1 and Generating a distribution image based on the second imaging data G2, it is intended to include.所定の波長域における吸収スペクトルが短波長側から順に第１、第２、第３及び第４の等吸収点を有する生体組織に含まれる第１及び第２の生体物質のモル濃度比の分布画像を生成する方法であって、第１の等吸収点と第２の等吸収点とで区画された第１の波長域、第２の等吸収点と第３の等吸収点とで区画された第２の波長域及び第３の等吸収点と第４の等吸収点とで区画された第３の波長域の光を纏めて選択的に取り出す第１の光学フィルタにより白色光から取り出した光を用いて生体組織を撮像して第１の撮像データＧ１を取得するステップと、第２の波長域の光を選択的に取り出す第２の光学フィルタにより白色光から取り出した光を用いて生体組織を撮像して第２の撮像データＧ２を取得するステップと、第１の撮像データＧ１及び第２の撮像データＧ２に基づいて分布画像を生成するステップと、を含むものである。
