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SÉQUENÇAGE DE RÉPERTOIRES D'ANTICORPS DE POULET APRÈS HYPERIMMUNISATION ET IDENTIFICATION D'ANTICORPS MONOCLONAUX À SPÉCIFICITÉ ANTIGÉNIQUE
专利权人:
CAMAS INCORPORATED
发明人:
FAGERLUND, Jeff,MITTENESS, Bradley, M.,PHILLIPS, Connie
申请号:
USUS2016/065331
公开号:
WO2017/100289A2
申请日:
2016.12.07
申请国别(地区):
US
年份:
2017
代理人:
摘要:
Neutralizing antibodies through recombinant protein expression were identified by mining antibody repertoires by high-throughput second generation sequencing. Sequencing across the majority of light and heavy chain variable regions of chicken immunoglobulins was performed at two immunological time points: a non-immune (naive) state and a post-hyperimmunization state. The mRNA was extracted from unsorted and unselected PBMC populations and identification of antigen-specific antibody sequences leveraged the significant disparity of abundance of an individual B cell clone in non-immune and immunized states. Through bioinformatic analysis, candidate amino acid sequences for variable heavy chain and light chains were identified. Recombinant polypeptides with the binding domains having the identified amino acid sequences for variable heavy chain and light chains were expressed and screened using immunoassays to confirm antigen-specificity.L'invention concerne des anticorps neutralisants obtenus par expression de protéines recombinées, lesdits anticorps ayant été identifiés par exploration de répertoires d'anticorps par séquençage à haut débit de seconde génération. Un séquençage de la majorité des fragments variables des chaînes légères et des chaînes lourdes d'immunoglobulines de poulet a été effectué à deux points temporels immunologiques : l'un à un état non immunitaire (naïf) et l'autre à un état après hyperimmunisation. L'ARNm a été extrait à partir de populations non triées et non sélectionnées de PBMC, et l'identification des séquences d'anticorps à spécificité antigénique a exploité la disparité significative d'abondance d'un clone de cellules B dans des états non immunitaire et immunisé. Par analyse bioinformatique, des séquences d'acides aminés candidates pour les fragments variables des chaînes légères et des chaînes lourdes ont été identifiées. Les polypeptides recombinés comportant les domaines de liaison disposant des séquences d'acides aminés identifiées po
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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