本发明属于生物制品领域,提供一种鼠伤寒沙门菌外膜蛋白L的编码基因、包括该基因的转移载体pUSG11/P28-OmpL、重组猪痘病毒rSPV-OmpL及其应用、制备方法。编码基因序列如SEQ ID NO.1所示。重组猪痘病毒是在猪痘病毒VR-363中插入鼠伤寒沙门菌外膜蛋白L基因获得的。重组猪痘病毒载体疫苗rSPV-OmpL能够在免疫动物体内大量表达目的蛋白OmpL,能够诱导动物体内产生较高效价的针对OmpL的抗体,并对免疫动物产生良好的保护作用,对小鼠的免疫保护率可高达80%,兼具有弱毒疫苗的免疫效果好和灭活疫苗的安全性高等特点,是一种理想的新型疫苗。