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一种快速高效的均一化全长cDNA文库构建方法
- 专利权人:
- 北京诺兰信生化科技有限责任公司
- 发明人:
- 罗昊澍,其他发明人请求不公开姓名
- 申请号：
- CN201210291096.2
- 公开号：
- CN102797044B
- 申请日:
- 2012.08.16
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 韩登营
- 摘要：
- 一种高效快速的均一化全长cDNA文库构建方法，该方法利用特定的5‑OH寡核苷酸封闭非全长mRNA，在用烟草酸焦磷酸酶除去mRNA5′端的帽子结构，使mRNA5′端帽子结构处的磷酸基团暴露出来，用高效的RNA连接系统在mRNA的5′端连上一段优化的寡聚核糖核酸作为引发第二链cDNA合成的引物结合位点，最后经反转录，二链合成、分级纯化后，将双链DNA克隆于载体中。该方法具有简洁高效的全长mRNA筛选功能，实现对真核生物全长mRNA的捕获，mRNA5′末端含有生物素标记，可用于全长mRNA分离，所用寡核苷酸引物含有优化的修饰方法及核苷酸序列，可实现真核生物mRNA全场捕获、反转录以及DNA的合成。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
