Коханов Александр Владимирович (RU),Белопасов Владимир Викторович (RU),Меснянкин Александр Алексеевич (RU),Ямпольская Ирина Сергеевна (RU),Луцева Оксана Алексеевна (RU)
申请号：
RU2011144738/15
公开号：
RU2011144738A
申请日:
2011.11.03
申请国别(地区):
RU
年份:
2013
代理人:
摘要：
FIELD: medicine, pharmaceutics.SUBSTANCE: invention refers to pharmaceutical industry, namely a method for preparing placental alkaline phosphatase. A method for preparing placental alkaline phosphatase consists in the fact that blood-washed human placenta is homogenised the homogenate is extracted in a solution of potassium chloride the extract was centrifuged, heated, centrifuged after the extract is primarily heated, the supernatant is heated again in the presence of cadmium sulphate the flask is quickly cooled ammonium sulphate is added the precipitate is separated by centrifugation the supernatant is subjected to hydrophobic column chromatography, and a ferment eluate is cleaned by preparative polyacrylamide gel electrophoresis the ferment gel is coloured the alkaline phosphatase fractions are sectioned under direct vision.EFFECT: method enables simplifying the process of preparing and cleaning the placental alkaline phosphatase enzyme with a significant yield increase.1 tbl, 2 exИзобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения плацентарной щелочной фосфатазы. Способ получения плацентарной щелочной фосфатазы заключается в том, что гомогенизируют отмытую от крови плаценту человека, экстрагируют гомогенат в растворе хлорида калия, центрифугируют полученный экстракт, прогревают, центрифугируют, полученный надосадок после первичного прогревания экстракта повторно прогревают в присутствии сульфата кадмия с последующим быстрым охлаждением колбы, добавляют сульфат аммония, отделяют осадок центрифугированием, надосадочную жидкость подвергают гидрофобной хроматографии на колонке, а ферментсодержащий элюат подвергают очистке препаративным электрофорезом в полиакриламидном геле, окрашивают гель, содержащий фермент, и под визуальным контролем, вырезают окрашенные фракции щелочной фосфатазы. Вышеописанный способ позволяет упростить технологический процесс получения и очистки фермента плацентарной щелочной фосфатазы с существенным увеличе
