本发明涉及生物技术领域,特别是涉及一种抗CD19抗体及其制备方法和用途。本发明提供一种抗CD19抗体,所述抗CD19抗体的重链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR‑H1、氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR‑H2和氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR‑H3;所述抗CD19抗体的轻链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的CDR‑L1、氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的CDR‑L2和氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的CDR‑L3。本发明发明人利用噬菌体展示技术对FMC63 scFv进行了亲和力成熟筛选,从而获得了高亲和力的对CD19的单链抗体。