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一种合成短单链脱氧核糖核苷酸探针的方法
专利权人:
昆山彭济凯丰生物科技有限公司
发明人:
彭长庚,温婷
申请号:
CN201310189835.1
公开号:
CN103276074A
申请日:
2013.05.21
申请国别(地区):
中国
年份:
2013
代理人:
董建林
摘要:
本发明属于DNA生物合成领域,具体涉及一种合成短单链脱氧核糖核苷酸探针方法及其应用,可用于检测小的非编码核糖核酸,如微核糖核酸,包括如下步骤:(1)制备重组有模板DNA的质粒;(2)切割并连接模板DNA,从重组质粒上酶切获得模板DNA,使模板DNA首尾连接成环;(3)切单链,滚环复制,用切口酶切断模板DNA的一条链,加入聚合酶以环状带切口的DNA为模板进行滚环复制,扩增出含颈环-探针结构的DNA单链;(4)目的短单链DNA的制备,对步骤(3)的产物采用Ⅱ型内切酶切割形成目的单链DNA探针和副产物DNA,通过PAGE分离纯化得到无突变的单链DNA探针。本发明在小非编码RNA检测领域和小非编码RNA相关疾病的诊断和治疗领域具有广泛用途。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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