The present invention provides methods of using sequence-based assays and rational strategies to improve the solubility of immunobinding agents, particularly single chain antibodies (scFv). The present invention provides a method of modifying an immunoconjugate, particularly an scFv, by performing one or more substitutions with a hydrophobic residue identified by database analysis of selected stable scFv sequences. The present invention also provides an immunoconjugate having an optimized solubility produced according to a variant of the present invention.본 발명은 면역결합제, 특히 단일 사슬 항체(scFv)의 용해도를 개선하기 위하여 서열에 기초한 분석 및 합리적인 전략을 사용하는 방법을 제공한다. 본 발명은 면역결합제, 특히 scFv를 선택된 안정한 scFv 서열의 데이터베이스 분석으로 확인된 소수성 잔기로 하나 이상의 치환을 수행하여 변형하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 본 발명의 변형방법에 따라 제조되는 최적화된 용해도를 가지는 면역결합제를 제공한다.