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一种利用D‑乳糖醇实现重组蛋白高效诱导表达的方法
- 专利权人:
- 吉林农业大学
- 发明人:
- 毕云枫,姜仁凤,沈明浩,徐琳琳,陈萍
- 申请号:
- CN201410692025.2
- 公开号:
- CN104357423B
- 申请日:
- 2014.11.26
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 张景林`王恩远
- 摘要:
- 一种利用D‑乳糖醇代替IPTG实现重组蛋白高效诱导表达的方法,属于基因工程药物制备技术领域。其是取活化及扩培后的果糖苷酶工程菌的菌液按2~5%(v/v)的接菌量接种接种于LB液体培养基,37℃,180~220r/min过夜培养;当菌液的紫外吸光值OD600为0.3~0.5时,添加诱导剂D‑乳糖醇,使D‑乳糖醇的终浓度为0.4~1.4mmol/L,然后在32~40℃条件下诱导3~8h,从而实现重组蛋白的高效诱导表达。实验表明D‑乳糖醇为诱导剂与IPTG诱导效果无差异,D‑乳糖醇为食品添加剂,无毒性,不被菌体降解,不需多次添加,因此乳糖醇可以代替IPTG作为以Lac为启动子的基因工程重组蛋白的理想诱导剂。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/