TECHNIQUES D'INGÉNIERIE DES PROTÉINES FAISANT APPEL À UN POLYMÈRE POUR AJUSTER RATIONNELLEMENT L'ACTIVITÉ, LA DÉPENDANCE VIS-À-VIS DU PH ET LA STABILITÉ DES ENZYMES
Using a novel water-soluble, active ester amide-containing functionalized controlled radical polymerization initiator, stimuli responsive polymers have been grown from the surface of a protein, exemplified by chymotrypsin or any protein having surface amino acids that will covalently bind to the active ester amide-containing functionalized initiator. It is shown that changes in temperature or pH can change the conformation of the polymer surrounding the enzyme, which in turn enabled the rational tailoring of enzyme activity and stability. This method has afforded an increase in the activity and stability of the enzyme by an order of magnitude at pH's where the enzyme is usually inactive or unstable. Multimodal temperature responsive protein-block copolymer conjugates are described.A l'aide d'un nouvel amorceur de polymérisation radicalaire contrôlée, de type hydrosoluble, fonctionnalisé, contenant un amide d'ester actif, on a pu faire croître des polymères sensibles aux stimuli à partir de la surface d'une protéine, représentée par la chymotrypsine ou toute protéine comportant des acides aminés de surface qui se lieront par covalence à l'amorceur fonctionnalisé contenant l'amide d'ester actif. Il est démontré dans la présente invention que les variations de température ou de pH peuvent modifier la conformation du polymère entourant l'enzyme, ce qui à son tour a permis l'adaptation rationnelle de l'activité et de la stabilité de l'enzyme. Ce procédé a permis un accroissement de l'activité et de la stabilité de l'enzyme d'un certain ordre de grandeur à des pH où l'enzyme est normalement inactive ou instable. Des conjugués multimodaux protéine-copolymère séquencé sensibles à la température sont en outre décrits.
