GARRY, Daniel J.,GARRY, Mary G.,KOYANO-NAKAGAWA, Naoko
申请号:
USUS2016/040431
公开号:
WO2017/004388A1
申请日:
2016.06.30
申请国别(地区):
US
年份:
2017
代理人:
摘要:
Described herein is a method for producing a chimeric non-human animal expressing a human NKX2-5, HANDII, TBX5 gene or a combination thereof gene comprising: a) generating a NKX2-5, HANDII, TBX5 or combination thereof null non-human animal cell, wherein both copies of the non-human NKX2-5, HANDII, TBX5 gene or combination thereof carry a mutation that prevents production of functional NKX2-5, HANDII, TBX5 protein or combination thereof in said non-human animal; b) creating a NKX2-5, HANDII, TBX5 or combination thereof null non-human blastocyst by somatic cell nuclear transfer comprising fusing a nucleus from said NKX2-5, HANDII, TBX5 or combination thereof null non-human animal cell of a) into an enucleated non-human oocyte and activating said oocyte to divide so as to form an NKX2-5, HANDII, TBX5 or combination thereof null non-human blastocyst; c) introducing human stem cells into the NKX2-5, HANDII, TBX5 or combination null non-human blastocyst of b); and d) implanting said blastocyst from c) into a pseudopregnant surrogate non-human animal to generate a chimeric non-human animal expressing human NKX2-5, HANDII, TBX5 or combination thereof.L'invention concerne un procédé permettant de générer un animal chimérique non humain exprimant un gène humain NKX2-5, HANDII, TBX5 ou une combinaison de ces derniers, comprenant les étapes consistant : a) à générer une cellule d'animal non humain nulle NKX2-5, HANDII, TBX5 ou une combinaison de ces dernières, les deux copies du gène non humain NKX2-5, HANDII, TBX5 ou la combinaison de ces derniers portant une mutation qui empêche la production d'une protéine fonctionnelle NKX2-5, HANDII, TBX5 ou une combinaison de ces dernières dans ledit animal non humain ; b) à créer un blastocyste non humain nul NKX2-5, HANDII, TBX5 ou une combinaison de ces derniers par transfert nucléaire de cellules somatiques comprenant la fusion d'un noyau à partir de ladite cellule d'animal non humain nulle NKX2-5, HANDII, TBX5 ou la combinaison de ce