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利用mTERT和mTyr双启动子联合调控HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用
- 专利权人:
- 天津农学院
- 发明人:
- 金天明,龙雨清,李萌,张东超,弓建芳,李小慧,高珂珂
- 申请号：
- CN201510377269.6
- 公开号：
- CN105002145B
- 申请日:
- 2015.07.01
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明公开了一种利用mTERT和mTyr双启动子联合调控HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用,采用从C57BL/6小鼠的胸腺DNA、小鼠黑色素瘤B16细胞总RNA和新城疫病毒(NDV)LaSota株中分别扩增出的mTERT启动子、mTyr启动子和HN基因,将获得的目的基因克隆到pShuttle‑IRES‑hrGFP‑2穿梭载体中,线性化重组穿梭载体后与骨架载体pAdeasy‑1共转染大肠杆菌BJ5183感受态细胞,使其在BJ5183内进行同源重组,构建了包含上述目的基因的重组腺病毒质粒Ad‑mTERTp‑Tyrp‑HN;将重组腺病毒质粒由PacⅠ酶切后,经脂质体介导转染HEK293细胞,包装获得高滴度的重组腺病毒;评价HN基因在双启动子的联合调控作用下对B16细胞的抑瘤效果。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
