It is an object of the present invention to provide a method for efficiently producing therapeutic corneal endothelial substitute cells, and in particular, to provide a method capable of stably producing a large amount in a state suitable for implantation into the eye (intraanterior chamber). . Furthermore, an object of the present invention is to provide a composition for transplantation suitable for administration into the eye, particularly into the anterior chamber. A corneal endothelial substitute cell sphere for treatment can be produced by suspension culture of stem cells in a differentiation induction medium containing a GSK3 inhibitor, a retinoic acid and a ROCK inhibitor. When transplanting the sphere or cultured corneal endothelial cells into a single cell into the eye (intraanterior chamber), the number of adherent cells after transplantation can be increased by adding a viscoelastic substance.本発明は、治療用角膜内皮代替細胞を効率的に製造する方法の提供、特に眼内（前房内）への移植に適した状態で多量に安定して製造できる方法の提供を課題とする。さらに本発明は、眼内、特に前房内への投与に好適な移植用組成物の提供を目的とする。幹細胞をＧＳＫ３阻害剤、レチノイン酸およびＲＯＣＫ阻害剤を含む分化誘導培地で浮遊培養することで治療用角膜内皮代替細胞スフェアを製造することができる。該スフェアあるいは単一細胞化した培養角膜内皮細胞を眼内（前房内）に移植する際、粘弾性物質を添加することにより、移植後の接着細胞数を増加させることが可能となる。
