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一种新型抗性质粒的构建及其在核黄素生产菌中的运用
- 专利权人:
- 江南大学
- 发明人:
- 饶志明,程毅鹏,杨套伟,满在伟,徐美娟,张显
- 申请号:
- CN201410746849.3
- 公开号:
- CN104531745A
- 申请日:
- 2014.12.09
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 摘要:
- 我们首次将抗性基因sat整合到质粒pMA5上构建出新的具有NTC抗性质粒pMA5-sat。另外,实验室前期筛选获得一株核黄素生产菌Bacillus subtilis RF1,该菌株对多种常规抗生素都有一定的抗性,所以对于该菌株运用质粒表达外源基因的抗性筛选造成了困难。为了验证所构建新型质粒的实用性,首次将来自Bacillus subtilis RF1自身的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因zwf连接抗性质粒pMA5-sat上,得到表达载体pMA5-sat-zwf,将表达载体转化到核黄素生产菌Bacillus subtilis RF1中得到重组菌Bacillus subtilis RF1/pMA5-sat-zwf。多次发酵罐结果表明重组菌发酵60h核黄素产量达到12.01g/L,比原始菌的9.22g/L提高了30.3%。说明新构建的重组质粒pMA5-sat能够用于枯草芽孢杆菌的代谢改造。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/