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一种制备用于检测猪瘟病毒血清抗体的可溶性E2抗原的方法
- 专利权人:
- 中国农业科学院兰州兽医研究所
- 发明人:
- 刘湘涛,尹双辉,孙世琪,田宏,尚佑军,韩雪清,刘艳红
- 申请号：
- CN200810150305.5
- 公开号：
- CN101418304A
- 申请日:
- 2008.07.06
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2009
- 代理人:
- 鲜 林
- 摘要：
- 一种制备用于检测猪瘟病毒血清抗体的可溶性E2抗原的方法，包括下述步骤：A.克隆E2基因抗原结构域部分；B.构建重组表达载体；C.在LB培养基中表达，获得可溶性的重组E2蛋白；D.亲和层析纯化重组E2蛋白；E.pGST-E2表达蛋白的鉴定，SDS-PAGE和Western Blotting鉴定表达的重组E2蛋白；F.利用重组E2蛋白建立检测猪瘟血清抗体间接ELISA方法。本发明改良了传统的LB培养基，促进可溶性的E2蛋白表达；解决了猪瘟病毒E2抗原在大肠杆菌中主要以包涵体表达的难题，获得的可溶性E2蛋白与完整猪瘟病毒粒子具有相似的免疫学效果，可作为替代猪瘟病毒粒子的抗原，建立敏感性、特异、安全和可靠的猪瘟病毒血清抗体的检测间接ELISA方法。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
