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具备双向启动子诱捕及质粒拯救功能的双元Ti质粒及其构建方法
- 专利权人:
- 江苏省农业科学院
- 发明人:
- 邓晟,林玲,王彩月,张昕,周益军
- 申请号:
- CN201310162982.X
- 公开号:
- CN103525861A
- 申请日:
- 2013.05.07
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明涉及一种植物及部分真菌T-DNA转化和T-DNA插入突变体库构建所使用的双元Ti质粒载体及其构建方法。首先,在质粒T-DNA区的两端都整合了绿色荧光蛋白报告基因sGFP的启动子捕获模块,并对两端sGFP开放阅读框之前的核酸序列进行了优化调整;其次,质粒拯救的功能模块也通过酶切位点整合到目标质粒中;最后,质粒整合了用于筛选转化子的潮霉素抗性基因,并且该基因及其启动子可以通过Sac I酶切位点进行自由替换,以适应不同的筛选目的和物种。双元Ti质粒载体的选择及其各模块的配置和优化会对转基因的效率、基因克隆及相关基因功能验证的便利性产生很大的影响。通过将多种质粒功能模块有机的整合到一个质粒上,既扩大了质粒的适用范围,又提高了筛选及克隆目标功能基因的效率,为找寻有益基因及其功能验证提供了一个很好的分子工具。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/