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一种pPIC9-ompA-Fc重组质粒、构建方法、在毕赤酵母表达系统中的诱导表达及其应用
- 专利权人:
- 山东农业大学
- 发明人:
- 朱瑞良,魏凯,胡莉萍,董雯雯,黄河,刘丽萍,李鑫,于翠莲,张浩
- 申请号：
- CN201610717365.5
- 公开号：
- 申请日:
- 2016.24.08
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明提供了一种pPIC9‑ompA‑Fc重组质粒、构建方法、表达及其应用,属于基因工程技术领域,以禽波氏杆菌DNA及以鸡脾脏mRNA为模版合成的cDNA为模版,通过PCR分别获得ompA‑linker基因和鸡IgY‑Fc‑linker基因,再将两份PCR产物进行SOE‑PCR得到ompA‑linker‑Fc融合基因,将融合基因连接至PMD18‑T克隆质粒,连接转化后对重组质粒进行测序,双酶切并连接至表达质粒pPIC9中,将连接产物转化受体菌,最后鉴定阳性转化子,获得pPIC9‑ompA‑Fc融合质粒。本发明成功克隆禽波氏杆菌ompA及鸡IgY Fc,并将两种基因成功融合至表达质粒,实现了重组质粒毕赤酵母高效表达,成本低廉,增强了融合蛋白的活性。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
