PURPOSE: A medium composition for cryopreservation of amniotic fluid-derived stem cells is provided to prevent damage of the stem cells and to enable long-term cryopreservation.CONSTITUTION: A medium composition for cryopreservation of amniotic fluid-derived stem cells contains trehalose, catalase, zVAD-fmk(carboxybenzoxy-v-aryl-alanyl-aspartyl-(O-methyl)-fluoromethyl ketone), and Me_2SO of low concentration. The concentration of Me_2SO, trehalose, catalase, and zVAD-fmk is 2.5-5%(v/v), 60 mmol/L, 100mg/mL, and 30 uM.COPYRIGHT KIPO 2012본 발명은 Me2SO 농도를 대폭 감소시키고 동물혈청(fetal bovine serum)을 제거하는 한편, 트레할로오즈, 수크로오즈 및 카탈라아제를 사용하여서 양수 줄기세포를 냉동 손상시키지 않으면서도 장기간 저온보존할 수 있는 방법에 관한 것으로, 이당류, 산화방지제 및 카스파아제 억제제를 첨가함으로써 표준 Me2SO 농도의 1/4을 사용하여 양수 유래의 줄기세포를 저온보존할 수 있다. 그 결과, 세포 동결 용액 중 저 농도 Me2SO의 사용은 AFSC의 임상 실험 발전을 뒷받침하는 산업적 효과를 갖는다.