Disclosed is a rice genetic engineering sterile line breeding method. The method comprises the following steps: A. obtaining a selection marker gene expression cassette; B. obtaining a rice EAT1 gene expression cassette; C. amplification of a maize lethal gene ZMAA1; D. amplification of a maize pollen specific promoter Pg47; E. connections of gene expression elements. F1-generation heterozygotes in the present invention abide by the law of segregation of Mendel in the process of self-fruiting, and the generated offspring comprises heterozygotes capable of maintaining triply linked genes and infertile sterile lines.L'invention concerne une méthode de sélection de lignée stérile de riz d'ingénierie génétique. La méthode comprend les étapes suivantes : A. l'obtention d'une cassette d'expression de gène marqueur de sélection ; B. l'obtention d'une cassette d'expression de gène EAT1 de riz ; C. l'amplification d'un gène létal de maïs ZMAA1 ; D. l'amplification d'un promoteur Pg47 spécifique au pollen de maïs ; E. la connexion d'éléments d'expression génique. Les hétérozygotes de la génération F1 dans la présente invention obéissent à la loi de ségrégation de Mendel dans le processus d'auto-fructification, et la descendance générée comprend des hétérozygotes aptes à maintenir des gènes triplement liés et des lignes stériles infertiles.本发明公开了一种水稻遗传工程不育系选育方法,包括以下步骤:A、筛选标记基因表达盒的获得;B、水稻EAT1基因表达盒的获得;C、玉米致死基因ZMAA1的扩增;D、玉米花粉特异性启动子Pg47的扩增;E、各基因表达元件的连接。本发明F1代杂合体在自交结实过程中遵循孟德尔分离定律,产生的后代既有能保持三连锁基因的杂合体,又有无育性的不育系。