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一种鉴定基因组编辑纯合突变体的方法
- 专利权人:
- 中国烟草总公司郑州烟草研究院;河南大学
- 发明人:
- 王燃,苗雨晨,郭敬功,李坤,金立锋,魏攀,王中,祁超亚,张林,李锋
- 申请号：
- CN201711351623.3
- 公开号：
- CN108220328A
- 申请日:
- 2017.12.15
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 时立新
- 摘要：
- 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种简便、快速的筛选、鉴定利用基因组编辑技术创建的纯合突变体的方法。该方法用于筛选与鉴定利用CRISPR/Cas9系统创建的纯合突变体，包括构建CRISPR/Cas9系统载体、转化植物体、利用MSBSP‑PCR筛选纯合突变体等步骤。本申请主要技术思路为：CRISPR/Cas9系统创制的突变体中，相比较于野生型的DNA，PCR反应获得少量的产物或者不能得到产物。另一方面，本申请采用的是两轮PCR，第一轮PCR的产物作为第二轮PCR的模板，可以避免基因组DNA复杂性对产物的影响，提高了PCR方法鉴定CRISPR/Cas9系统创制突变体的效率。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
