The present invention relates to a method for producing an antimicrobial active substance against a plant pathogen and an antimicrobial composition containing the antimicrobial active substance. More particularly, the present invention relates to a method for producing an antimicrobial active substance against a plant pathogenic bacterium, To a method for producing an antimicrobial active substance against a plant pathogenic bacterium using the promoting medium and an antimicrobial composition containing the same. (A) inoculating a Luria-Bertani (LB) medium supplemented with proline to a strain of Photorhabdus spp.; (b) culturing said inoculated Photorhabdus spp. strain; And (c) filtering the culture medium with a filter paper to obtain an antimicrobial active substance against plant pathogenic bacteria. According to the present invention, it is possible to maximize the production of an antimicrobial substance against plant pathogenic fungi from a bacterium belonging to the genus Portapudus, which is a symbiotic bacterium of the nematode, so that it is possible to replace the existing chemical insecticides and BTI import preparations, can do.본 발명은 식물 병원균에 대한 항균활성 물질의 제조방법 및 이를 포함하는 항균 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 선충 공생세균인 포토랍두스 속 균주로부터 식물병원균에 대한 항균활성 물질이 분비되는 것을 발현 및 촉진시키는 배지를 이용한 식물 병원균에 대한 항균활성 물질의 제조방법 및 이를 포함하는 항균 조성물에 관한 것이다.식물 병원균에 대한 항균활성 물질의 제조방법은 (a) 프롤린(proline)이 첨가된 Luria-Bertani(LB) 배지에 포토랍두스 속(Photorhabdus spp.) 균주를 접종하는 단계; (b) 상기 접종된 포토랍두스 속(Photorhabdus spp.) 균주를 배양하는 단계; 및 (c) 배지 배양액을 여과지로 걸러내어 식물 병원균에 대한 항균활성 물질을 획득하는 단계를 포함한다.본 발명에 따르면, 선충 공생세균인 포토랍두스 속 균주로부터 식물병원균에 대한 항균물질의 생산을 최대화시킬 수 있으므로, 기존에 사용되어지는 화학 살충제 및 BTI 수입제제를 대체하면서, 식물병원균을 보다 효과적으로 방제할 수 있다.