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一种苜蓿遗传转化的方法
- 专利权人:
- 吉林师范大学
- 发明人:
- 周晓馥,徐洪伟,吕杰
- 申请号:
- CN201210112182.2
- 公开号:
- CN103074363B
- 申请日:
- 2012.04.17
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 石岱
- 摘要:
- 本发明涉及一种苜蓿遗传转化的方法,属于遗传工程技术领域,具体的说公开了一种苜蓿种子整体侵染的方法,该方法包括测成熟苜蓿种子的生理吸胀曲线;含目标基因的根癌农杆菌培养;苜蓿种子的灭菌;将经灭菌的苜蓿种子转入到OD600值为0.8-1.3的根癌农杆菌菌液中侵染8-10小时;共培养;抗性植株的筛选;抗性植株的生根及扩繁;转化植株炼苗及移栽等步骤。本发明首次采用成熟苜蓿种子作为实验材料,结合苜蓿种子生理吸胀曲线中不发生损伤的吸胀停滞点为8-10小时,在种子吸胀阶段用发根农杆菌菌液浸泡侵染种子8-10小时,大大提高了转化效率和转化植株的获得数量;经过采用压力筛选培养基对抗性植株进行的筛选,缩短了实验周期2-3个月,简化了实验过程和转化后的鉴定工作量,对苜蓿基因工程的理论研究及遗传育种实践均具有重要意义。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/