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一种土壤样品中微生物基因组的快速提取方法
- 专利权人:
- 安徽远大机械制造有限公司
- 发明人:
- 高宇
- 申请号:
- CN201510876679.5
- 公开号:
- CN105441423A
- 申请日:
- 2015.12.03
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 倪波
- 摘要:
- 本发明公开一种土壤样品中微生物基因组的快速提取方法,将土壤样品在液氮中研磨粉碎,粉碎后样品中加入基因组提取缓冲液,37℃水浴温育30min,然后加入蛋白酶K溶液和SDS溶液,55℃水浴30min,离心弃沉淀,收集上清液,用苯酚第一次抽提,离心收集上清液,用苯酚、氯仿和异戊醇的混合液第二次抽提,离心收集上清液,向上清液中加入乙醇或异丙醇,将全部液体离心通过DNA回收纯化柱,回收纯化柱再次经高速离心干燥,最后加入DNA洗脱液,经离心得到微生物基因组样品。本发明提取的基因组产量可以达到80ug/g;DNA完整性高,大小在23kb以上,没有RNA或者蛋白质的污染,OD260/OD280接近标准值。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/