The invention provides a one-step process for preparing a cell-binding agent cytotoxic agent conjugate comprising contacting a cell-binding agent with a cytotoxic agent to form a first mixture comprising the cell-binding agent and the cytotoxic agent and contacting the first mixture comprising the cell-binding agent and the cytotoxic agent with a bifunctional crosslinking reagent, which provides a linker, in a solution having a pH of about 4 to about 9 to provide a second mixture comprising the cell-binding agent cytotoxic agent conjugate, wherein the cell-binding agent is chemically coupled through the linker to the cytotoxic agent, free cytotoxic agent, and reaction by-products. The second mixture is then optionally subjected to purification to provide a purified cell-binding agent cytotoxic agent conjugate.본 발명은 세포-결합 작용제 세포독성제 접합체를 제조하기 위한 일-단계 방법을 제시하고, 상기 방법은 세포-결합 작용제를 세포독성제와 접촉시켜 세포-결합 작용제와 세포독성제를 포함하는 첫 번째 혼합물을 형성하고, 그리고 약 4 내지 약 9의 pH를 갖는 용액 내에서 세포-결합 작용제와 세포독성제를 포함하는 첫 번째 혼합물을 링커를 제공하는 이작용성 가교 시약과 접촉시켜 세포-결합 작용제 세포독성제 접합체, 여기서 세포-결합 작용제는 링커를 통해 세포독성제에 화학적으로 커플링되고, 유리 세포독성제, 그리고 반응 부산물을 포함하는 두 번째 혼합물을 제공하는 단계를 포함한다. 두 번째 혼합물은 이후, 정제된 세포-결합 작용제 세포독성제 접합체를 제공하기 위해 정제에 선택적으로 종속된다.
