Human pluripotent stem cells (hPSCs), especially induced pluripotent stem cells (iPSCs), are promising starting points for generating mimic innate immune cells such as natural killer (NK) cells and γδ T cells for cancer immunotherapy. Provide materials. To facilitate continuous mass production, an overall manufacturing scheme for generating mimic innate immune cells from hPSCs has been designed and demonstrated. In particular, sequential hematopoietic differentiation on a stromal cell line deficient in M-CSF expression and lacking M-CSF expression, without utilizing CD34 + cell enrichment and rotoembryoid body formation, and DLL1 differentially expressed A strong protocol is established to differentiate hPSCs into NK cells or γδ T cells by lymphoid commitment on ectopically expressed stromal cell lines. Using this two-step protocol, generation of functionally mimicking NK cells and functionally mimicking γδNKT cells from hPSCs including hESCs, peripheral blood cell derived iPSCs (PBC-iPSCs), non-T cell derived iPSCs or γδ T cell derived iPSCs, In addition, the use of these mimetic innate immune cells to kill cancer cells has been demonstrated. [Selection diagram] Fig. 1ヒト多能性幹細胞（ｈＰＳＣ）、特に誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）は、がん免疫療法のためのナチュラルキラー（ＮＫ）細胞及びγδＴ細胞などの模倣自然免疫細胞を作製するための有望な出発材料を提供する。連続した大量生産を容易にするために、ｈＰＳＣから模倣自然免疫細胞を作る全体的な製造スキームが、設計され、実証された。特に、ＣＤ３４＋細胞富化及び回転胚様体形成を利用しない、Ｍ－ＣＳＦ発現を欠損している間質細胞株上での逐次的造血分化並びにＭ－ＣＳＦ発現を欠損しており、ＤＬＬ１を異所的に発現する間質細胞株上でのリンパ様コミットメントによってＮＫ細胞又はγδＴ細胞へとｈＰＳＣを分化させる強力なプロトコールが、確立される。この２段階プロトコールを使用して、ｈＥＳＣ、末梢血細胞由来ｉＰＳＣ（ＰＢＣ－ｉＰＳＣ）、非Ｔ細胞由来ｉＰＳＣ又はγδＴ細胞由来ｉＰＳＣを含むｈＰＳＣからの機能的模倣ＮＫ細胞及び機能的模倣γδＮＫＴ細胞の生成、並びにがん細胞を死滅させるこれらの模倣自然免疫細胞の使用が実証された。【選択図】 図１
