MAX-PLANCK-GESELLSCHAFT ZUR FÖRDERUNG DER WISSENSCHAFTEN E.V.;EUROPÄISCHES LABORATORIUM FÜR MOLEKULARBIOLOGIE (EMBL)
发明人:
Thomas Tuschl,Sayda Elbashir,Winfried Lendeckel,Wilm Matthias,Reinhard Lührmann
申请号：
CZ2011-452
公开号：
CZ308053B6
申请日:
2001.11.29
申请国别(地区):
CZ
年份:
2019
代理人:
摘要：
Dvouřetězcová RNA (dsRNA) vyvolává sekvenčně specifické post-trankripční zhášení genu u mnoha organizmů způsobem, který je znám jako RNA interference (RNAi). Za použití in vivo systému organizmu Drosophila se ukázalo, že krátké fragmenty RNA obsahující 19 až 23 nukleotidů jsou sekvenčně specifickými mediátory RNAi. Krátké interferující RNA (siRNA) vznikly zpracováním dlouhých dsRNA reakcí podobné reakci Rnázy III. Chemicky syntetizované duplexy siRNA s přesahujícími 3´-konci zprostředkovávají účinné štěpení cílové RNA v lyzátu a místa štěpení se nacházejí blízko centra oblasti pokryté řídicí siRNA. Dále se popisuje důkaz, že směr zpracování dsRNA stanoví, zda připravený komplex siRNA štěpí pozitivní nebo negativní cílovou RNA.Double stranded RNA (dsRNA) induces sequence-specific post-transcriptional gene quenching in many organisms in a way known as RNA interference (RNAi). Using the in vivo Drosophila system, short RNA fragments containing 19 to 23 nucleotides have been shown to be sequence-specific RNAi mediators. Short interfering RNAs (siRNAs) were generated by processing long dsRNA reactions similar to the Rnaza III reaction. Chemically synthesized siRNA duplexes extending beyond the 3'-end mediate efficient cleavage of the target RNA in the lysate and cleavage sites are located near the centre of the region covered by the control siRNA. A description of the evidence is provided that the direction of dsRNA processing determines whether the prepared siRNA complex cleaves positive or negative target RNA.
