A method for preparing a replication-defective recombinant H9N2 avian influenza virus expressing HA of H5N1 subtype, comprising constructing a replication-defective recombinant avian influenza virus steadily expressing surface glycoprotein hemagglutinin (HA) of both H9N2 and H5N1 subtypes and subjecting to replication and packaging in a MDCK cell capable of steadily expressing neuraminidase (NA) of both H9N2 subtype to form a recombinant virus particle. The virus particle can be used to prepare an attenuated vaccine.L'invention concerne un procédé de préparation d'un virus de La grippe aviaire H9N2 recombinant à réplication défectueuse exprimant HA du sous-type H5N1, comprenant la construction d'un virus de la grippe aviaire recombinant à réplication défectueuse exprimant de manière stable l'hémagglutinine de la glycoprotéine de surface (HA) des sous-types H9N2 et H5N1 et la soumission à la réplication et à l'encapsidation dans une cellule MDCK capable d'exprimer de manière stable la neuraminidase (NA) du sous-type H9N2 pour former une particule virale recombinante. La particule virale peut être utilisée pour préparer un vaccin atténué.一种制备表达H5N1亚型HA的复制缺陷重组H9N2禽流感病毒的方法,包括构建同时稳定表达H9N2和H5N1亚型的表面糖蛋白血凝素HA的复制缺陷型重组禽流感病毒,在可稳定表达神经氨酸酶H9N2亚型NA的MDCK细胞中复制、包装出重组病毒粒子。该病毒粒子可用于制备弱毒疫苗。