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一种带亮氨酸拉链结构域蛋白单克隆抗体的制备及鉴定方法
- 专利权人:
- 东南大学
- 发明人:
- 谢维,刘加彬,汪道涌,张建琼
- 申请号:
- CN200510040404.4
- 公开号:
- CN1710078A
- 申请日:
- 2005.06.07
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2005
- 代理人:
- 叶连生
- 摘要:
- 带亮氨酸拉链结构域蛋白单克隆抗体的制备及鉴定方法,是一种单克隆抗体的制备及鉴定方法,其制备的方法为:根据ecp基因全长cDNA序列设计上、下游两条引物进行PCR扩增;用纯化的ECP-GST融合蛋白免疫6~8周龄Balb/c雌鼠;取小鼠脾脏细胞与骨髓瘤Sp2/0细胞在聚乙二醇作用下进行体外融合,得到抗ECP的单克隆抗体。鉴定的方法为:细胞上清mAb的效价测定:mAb的Ig亚类测定:mAb特异性鉴定:抗原表位的确定:结果表明,此抗体识别的抗原表位在231~300aa这一区段内。利用该抗体可以高效、特异性的在果蝇各组织中检测到ECP蛋白的表达;同时,利用该抗体,在小鼠不同组织中也能检测到阳性信号,具有潜在的广谱性应用价值。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/