本发明涉及GM-CSF-HER2重组蛋白及其方法和应用,具体涉及一种能够用于治疗肿瘤药物的GM-CSF-HER2重组蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;还包括其制备方法:将GM-CSF的基因序列和HER2的基因序列通过酶切克隆到质粒pCEP4中构建重组质粒,重组质粒转染人胚胎肾293细胞进行重组蛋白的表达,纯化收集所述的重组蛋白,该重组蛋白可以用于生产治疗肿瘤药物,如乳腺癌,本发明用基因工程方法将肿瘤特异性抗原和转导蛋白以及体外诱导DC细胞的关键试剂GM-CSF结合,制备出具有特异性且能延缓DC细胞寿命的融合蛋白,保证了DC细胞存活时间的延长以及特异性免疫应答的启动,GM-CSF-HER2重组蛋白避免了常规DC细胞培养中GM-CSF的额外添加,解决了培养周期中GM-CSF不足的缺点,并且共表达GM-CSF还可促进细胞毒作用。