A method of thawing cryopreserved human hepatocytes and cryopreserving the hepatocytes a second time without losing viability is described. It allows the preparation of cryopreserved human hepatocytes pooled from multiple donors by thawing the hepatocytes from the individual donors, combining the cells to form pooled hepatocytes, and recryopreserving the pooled hepatocytes. The method involves the thawing of the hepatocytes from the individual donors, maintaining the thawed hepatocytes at a low temperature that is above freezing temperature (e.g., 4 °C), and refreezing the thawed cells without further manipulation. The method allows the cryopreserving the human hepatocytes a second time after thawing, with viability similar to that after one single cryopreservation. This high efficiency method can be used for the preparation of highly viable pooled human hepatocytes for experimentation to minimize individual variations.La présente invention concerne un procédé de décongélation dhépatocytes humains cryoconservés et de cryoconservation des hépatocytes humains une seconde fois sans perte de viabilité. Le procédé permet la préparation dhépatocytes humains cryoconservés rassemblés de multiples donneurs par décongélation des hépatocytes des donneurs individuels, combinaison des cellules pour former des hépatocytes rassemblés, et nouvelle cryoconservation des hépatocytes rassemblés. Le procédé implique la décongélation des hépatocytes des donneurs individuels, la conservation des hépatocytes décongelés à une température basse qui est supérieure à la température de congélation (par exemple, 4°C), et la nouvelle congélation des cellules décongelées sans autre manipulation. Le procédé permet la cryoconservation des hépatocytes humains une seconde fois après la décongélation, avec une viabilité similaire à celle après une cryoconservation unique. Ce procédé à grande efficacité peut être utilisé pour la préparation dhépatocytes humains rassemblés extrêmement viables pour des ex
