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一种直接产生妥布霉素的工程菌及其应用
- 专利权人:
- 沈阳药科大学
- 发明人:
- 夏焕章,隋鑫,余永红,侯曦凡
- 申请号：
- CN200810011472.1
- 公开号：
- CN101392229B
- 申请日:
- 2008.05.20
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明属于医药技术领域，涉及一种直接产生妥布霉素的工程菌及其应用，主要是对妥布霉素产生菌中氨甲酰转移酶基因实施了破坏，菌种不再产生氨甲酰妥布霉素，而是产生妥布霉素。本发明通过框架内删除失活的方法阻断黑暗链霉菌中tacA基因，包括构建tacA基因阻断质粒、阻断质粒pSPU303转化黑暗链霉菌H6、筛选双交换菌株与发酵产物检测、新组分鉴定。框架内删除失活的方法为PCR分别获得tacA基因上下游分子量不低于500bp两个片段，将两者同时连接到pIJ2925中，再往片段的一端连入在黑暗链霉菌中能表达的抗生素抗性基因如红霉素抗性基因ermE，利用BglII酶切将三个基因片段连到穿梭载体pHZ132中。本发明可以简化生产工艺、降低生产成本，便于进行产品的质量控制。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
