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一种NK细胞体外扩增方法
专利权人:
北京焕生汇生物技术研究院
发明人:
姚玲玲,杨苗,杨敏,孟得龙,宋丹,刘得娟
申请号:
CN201710375838.2
公开号:
CN106967682A
申请日:
2017.05.25
申请国别(地区):
中国
年份:
2017
代理人:
仲伯煊
摘要:
本发明公开了一种NK细胞体外扩增方法,包括:(1)配制主要成分为50ng/ml抗CD3单克隆抗体+50ng/ml抗CD16单克隆抗体的试剂A、主要成分为300IU/ml IL‑2的试剂B和主要成分为20ng/ml IL‑12+20ng/ml IL‑15的试剂C,准备淋巴细胞分离液40ml作为试剂D;(2)取试剂A于T‑175培养瓶包被,4℃过夜;(3)处理外周血,得到细胞和血清;(4)重悬细胞,添加试剂D后离心收集PBMC;(5)将PBMC重悬于X‑VIVO15培养基中,添加试剂B、试剂C和自体血清,孵育;(6)分别在第3、6、9、12天补加培养基、试剂B、试剂C和自体血清,第14天收集细胞。本发明的有益之处在于:通过提前接种抗CD3单克隆抗体和抗CD16单克隆抗体,先对细胞进行筛选,所以在体外培养时提高了NK细胞的扩增倍数和纯度。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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