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一种MDCK-MDR1的药物吸收筛选体系及其构建方法
- 专利权人:
- 中山珐玛斯医药科技有限公司
- 发明人:
- 戴仁科,王珍玉,戴天明,江伟凡,郭佳音,邓继峰
- 申请号:
- CN201711236916.7
- 公开号:
- CN108085298A
- 申请日:
- 2017.11.30
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 夏艳
- 摘要:
- 本发明公开了一种MDCK‑MDR1的药物吸收筛选体系及其构建方法,针对MDCK细胞中犬P‑gp基因设计出了sgRNA,将设计的sgRNA序列合成Oligo,构建sgRNA表达载体;将人源MDR1基因转染至MDCK‑KO细胞中,筛选扩大阳性单克隆;蛋白免疫印迹法检测p‑gp蛋白表达,成功表达者即表示MDCK‑MDR1的药物吸收筛选体系构建成功。本发明基于工程技术敲除MDCK细胞中犬P‑gp蛋白的基因,以背景完全“干净”的MDCK细胞作为宿主细胞构建稳定表达人源p‑gp蛋白的MDCK‑MDR1细胞系,从而完善MDCK‑MDR1作为血脑屏障药吸收、转运筛选模型的功能。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/